医药探秘 | 噬菌体技术革新药品生产，铸就品质安全新标杆

　　噬菌体控制：守护药品生产的安全卫士

　　在药品生产过程中，噬菌体控制是一个不可忽视的环节。

　　新生牛血清是生物制品生产中的一种重要原材料，噬菌体的污染会直接影响到生物制品的质量，尤其是活疫苗的生产；而对于大肠杆菌种子库，噬菌体污染可能导致大肠杆菌裂解，从而影响发酵过程的稳定性和效率，进而影响产物的产量和质量，所以为保证产品质量，对噬菌体的监控和控制非常必要！

　　噬菌体检测：双法并用宿主菌优选策略

　　参考中国药典3604章节，可以采用双层平板-噬斑法和增殖法两种方法检测噬菌体，噬斑是在固体培养基上由一个噬菌体复制增殖并裂解宿主菌后形成的溶菌空斑，通过噬斑计数，可以测定一定体积内的噬菌体单位数目，即噬菌体的数量双层平板-噬斑法，先在培养皿中倒入底层固体培养基，凝固后再倒入含有宿主细菌和一定稀释度噬菌体的半固体培养基，培养一段时间后，可计算噬菌斑的数量；

　　而增殖法则是先将样品与宿主菌悬液混合，使样品中的噬菌体先进行增殖，之后将样品液点种在用大肠杆菌均匀覆盖的培养基表面，观察噬斑的形成。

　　无论使用哪一种方法，宿主菌的选择都直接影响到检测的准确性和效率。噬菌体的宿主特异性和种类多样性为检测噬菌体增加了难度，故在宿主菌选择时，应考虑以下几点：

　　1.宿主菌的特异性：选择的宿主菌应当与噬菌体具有高度的特异性，以确保检测结果的准确性。例如，如果目标是检测大肠杆菌噬菌体，应选择大肠杆菌的某个特定菌株作为宿主菌。

　　2.宿主菌的生长条件：宿主菌应在易于培养和维持的条件下快速生长，以便进行有效的噬菌体增殖。

　　3.宿主菌的易用性：选择的宿主菌应当容易处理和保存，以便在实验室条件下方便使用。

　　4.宿主菌的通用性：理想情况下，宿主菌应当能够被广泛接受和用于不同类型的噬菌体检测，这样可以减少实验室需要维护的宿主菌种类。

　　5.宿主菌的可获得性：选择的宿主菌应当是容易获得的，无论是通过商业渠道还是实验室培养。

　　6.噬菌体的裂解效率：选择的宿主菌应当能够被噬菌体高效裂解，以便在检测过程中产生清晰的噬菌斑。

 

　　多管齐下：提升大肠杆菌噬菌体检测的准确性

　　根据现有文献可知，想提高噬菌体的检出率，只选用一种宿主菌不太可能实现，所以在进行大肠杆菌噬菌体检测时，应至少用两种以上的宿主菌依次检测，减少漏检的可能性。

　　如果样品中混杂有其他来源的细菌，应注意不同细菌菌株之间可能发生由于产生细菌素而引起的抑菌生长现象，其表现类似与噬菌体造成的现象，而血清中还可能含有一些自然的杀菌成分，故在噬菌体检测过程中，为了避免假阳性结果，确保检测结果的准确性和可靠性，通常需要采取一系列措施进行样品的再次验证。

　　以下是一些常用的验证策略：

　　1.重复实验：对同一样品进行多次独立实验，以验证结果的一致性。如果每次实验都得到相同的结果，那么假阳性的可能性就会大大降低。

　　2.使用不同的检测方法：采用两种或多种不同的噬菌体检测方法，比如增殖法和噬斑法，对样品进行检测。如果不同的方法都得到相同的结果，这将增加结果可信度。

　　3.对照实验：设置适当的正对照和负对照。正对照可以使用已知含有特定噬菌体的样品，而负对照则使用已知不含该噬菌体的样品。通过对照实验，可以验证检测系统的准确性和特异性。

　　4.阳性结果验证试验：将阳性结果的样品进行转种和跳板接种试验，确认阳性结果可靠。

　　通过上述措施的综合应用，可以有效减少假阳性结果的发生，确保噬菌体检测的准确性和可靠性。

　　华测药品检测服务：噬菌体检测

　　服务内容

　　1.定制验证方案：针对客户样品制定专属的验证方案，出具验证报告，确认测试方法的可靠性。

　　2.样品中噬菌体污染检测：目前实验室已对双层平板-噬斑法和增殖法完成内部验证，已建立质量控制程序，可以对新生牛血清或大肠杆菌种子库等样品进行噬菌体测试。

　　3.客户沟通与反馈：建立开放的沟通渠道，鼓励客户提供反馈，以便及时解决客户的疑问和关切。根据客户的具体需求，提供定制化的检测服务和解决方案。

　　优势与承诺

　　1.科学方法：采用最新的科学研究及行业标准指导具体服务。

　　2.专业团队：团队均由经验丰富的微生物学家和质量控制专家组成。

　　3.定制服务：根据客户的个性化需求，可以提供定制化的解决方案。

　　4.持续支持：提供持续的技术支持和咨询服务，及时满足客户需求。

　　参考文献：

　　1.中国药典2020年版三部通则<3604新生牛血清>.

　　2.Ge,H.,et al.,The"fighting wisdom andbravery"of tailed phage and host in the process of adsorption[J].Microbiological Research,2020.230:p.126344.