种子纯度是评价小麦种子质量的重要指标之一,准确鉴定小麦种子的纯度对于提高小麦的产量与品质等具有重要意义。
国家标准GB 4404.1-2008中规定了小麦良种的纯度应达99%,麦种纯度的高低直接影响小麦产量和农民收入,因此种子纯度检测工作至关重要。
种子纯度是指样品中待测品种种子数或株数占供检样品种子总粒数或总株数的百分比,是种子分级和评定种子质量优良程度的基本依据。在生产上,种子纯度检测能防止种子混杂退化,提高种子品质,并能延长良种的使用年限,充分发挥良种种性。
一、传统的鉴定方法
传统的鉴定方法包括种子形态检验法、幼苗形态鉴定、田间小区种植鉴定。
01 种子形态检验法
种子形态检验法简单、经济、快速,但准确性较差,由于育种目标趋同选育品种的增加,不同品种间种子外观形态的差异越来越小,因此靠区别种子形态上的差异来鉴定种子纯度也变得越来越困难。
02 幼苗形态鉴定
幼苗形态鉴定中某些数量性状的鉴定只能用于真实性鉴定,不能用于鉴定异型株。
03 田间小区种植鉴定
田间小区种植鉴定虽然是通用的且比较可靠的方法,但所需时间较长,当年生产的种子要等下一个生长季节或异地鉴定才能得到结果,时间上无法满足种子贸易的验证需要,往往丧失商机;而且这种方法受环境影响颇大,使得鉴定结果的准确性受到一定程度的影响。
二、新型的鉴定方法
由于传统的鉴定方法的诸多不足,寻找一种快速、简便、准确、实用的室内检测方法来代替传统鉴定方法已成必然。
01 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术
小麦种子中含有各种贮藏蛋白,不同小麦品种由于遗传组成不同,种子内所含的蛋白质种类有差异。这种差异可利用电泳图谱加以鉴别,从而对品种真实性和纯度进行鉴定。
早期的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术就是利用从种子中提取的蛋白在凝胶的分子筛效应和电泳分离的电荷效应作用下可良好分离的特性,从而得到清晰、稳定、准确的电泳图谱。因此,可以利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳来分离和鉴定蛋白质,还可以根据迁移率大小测定某些蛋白质的分子量。通过获得的蛋白质谱带可以测定小麦种子的纯度,并鉴定小麦种子的真实性。不仅是小麦,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术也在其他物种的纯度鉴定上有广泛应用,例如农业部标准NY/T 449-2001就规定了利用盐溶蛋白检测玉米种子纯度的方法。
但对于某些遗传组成非常接近的品种,如保持系和不育系,不易找到特异蛋白,采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳难以发现特征带。另外,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱易受种子(或幼苗)发育阶段及表达器官的影响,有时不够稳定,从而影响了鉴定结果的准确性。
02 DNA分子标记鉴定技术
在蛋白质电泳检测的基础上,DNA分子标记鉴定技术快速发展。DNA分子标记鉴定是以品种DNA片段作为检测对象,运用电泳方法检测品种基因组DNA结构与组成,通过对品种DNA的多态性即DNA碱基序列的差异进行分析,从而鉴别不同品种。目前在品种纯度鉴定上所用的DNA分子标记主要有以PCR扩增为基础的SSR技术。SSR标记技术DNA用量少、技术要求低、多态性水平高、成本低廉,为共显性标记;PCR扩增时退火温度在56℃左右,保证了PCR扩增的准确性,因此SSR技术是当前应用最广泛的品种纯度检验方法之一。利用SSR标记建立品种指纹图谱档案,将被鉴别品种的SSR指纹与标准图谱作对照,可进行品种真实性和种子纯度检验。
农业部标准NY/T 3749-2020也规定了利用SSR标记技术鉴定小麦品种纯度的方法,因此SSR标记技术必将成为今后解决品种产权纠纷、种子纯度责任事故的仲裁技术依据之一。
三、我们的服务
CTI华测检测通过了农作物种子质量检验机构(CASL)资质,同时也是中国合格评定认可委员会(CNAS)认可实验室,具备独立向社会出具第三方检测报告的资格,报告具有国际公信力。种子检测项目主要包括净度分析、水分测定、发芽率,品种纯度、品种真实性、转基因,重量及生活力的检测。
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